島津 HPLC操作要點(diǎn)，核心就是：穩(wěn)開機(jī)、嚴(yán)過濾、慢平衡、規(guī)范進(jìn)樣、沖干凈關(guān)機(jī)、勤維護(hù)。下面用大白話講全流程要點(diǎn)和禁忌，好記、好操作。
環(huán)境與電源
室溫 15–30℃、濕度＜60%，遠(yuǎn)離震動、陽光直射；電源接地要好，防止干擾與觸電。
流動相
必須用 色譜純 試劑 + 超純水
配好后 0.45μm 或 0.22μm 濾膜過濾，超聲脫氣 10–20 分鐘
緩沖鹽要現(xiàn)配現(xiàn)用，pH 要準(zhǔn)；嚴(yán)禁未過濾直接上機(jī)
色譜柱
確認(rèn)型號、柱壓上限（一般 C18＜20 MPa）；新柱先看說明書活化
儀器檢查
管路不漏液、溶劑瓶夠量、廢液桶清空、進(jìn)樣針 / 閥干凈
開泵、檢測器、柱溫箱、工作站，等待自檢
泵排氣（Purge）
打開泵排氣閥，按 Purge 鍵（默認(rèn)約 3–5 min，大流速沖）
看到管路無氣泡再關(guān)閥；有氣泡必重排，否則壓力亂、基線跳
設(shè)參數(shù)：流速（常用 1.0 mL/min）、柱溫（30–40℃）、波長、運(yùn)行時(shí)間
系統(tǒng)平衡
用流動相沖至 基線平穩(wěn)、壓力穩(wěn)定（通常 30–60 min）
含鹽流動相平衡更慢；沒平衡好別進(jìn)樣
手動進(jìn)樣（常用）
樣品必須 0.22μm 過濾，無渾濁、無顆粒
進(jìn)樣針先用樣品潤洗 ≥5 次，排凈氣泡
閥打到 Load 上樣 → 平穩(wěn)切到 Inject 同時(shí)開始采集
進(jìn)樣量不超定量環(huán)的 50–70%（如 20μL 環(huán)≤10–15μL）
自動進(jìn)樣器
樣品瓶液面夠、瓶蓋擰緊、無氣泡
設(shè)定進(jìn)樣體積、洗針程序（每樣后洗針）
樣品盤輕推到位，聽到 “咔嗒" 再運(yùn)行
壓力監(jiān)控（最關(guān)鍵）
正常壓力波動＜±5%；突然升高 30%→立即停泵
堵因：濾膜臟、柱頭堵、管路折扁、鹽結(jié)晶
壓力驟降：漏液、溶劑空、單向閥壞
基線與峰形
漂移大：未平衡、溫度變、氘燈弱、流動相污染
峰拖尾 / 前伸：柱臟、pH 不對、過載、進(jìn)樣污染
嚴(yán)禁
流速猛升猛降（要逐步調(diào)）
柱溫忽高忽低
運(yùn)行中拆柱、擰接頭（必須先停泵、泄壓）
用純水 / 10% 甲醇沖鹽（最容易忘）
流動相含緩沖鹽：
先用 10% 甲醇 / 水 0.5–1.0 mL/min 沖 45–60 min → 再純甲醇沖 30 min
只用有機(jī)溶劑：直接甲醇 / 乙腈沖 30 min
色譜柱保存
反相 C18：純甲醇或乙腈封存，兩頭堵頭
正相柱：正己烷封存
長期不用：定期拿出來沖一遍
每周
更換 / 清洗流動相吸濾頭（堵了最易壓力高）
擦進(jìn)樣閥、洗針、擦檢測器流通池窗口
每月
檢查泵密封墊（漏液就換）
檢查氘燈使用時(shí)間（壽命約 2000 小時(shí)，能量低就換）
每季度
測柱效（理論塔板數(shù)），判斷柱子要不要再生或更換
流動相不過濾、不脫氣 → 堵柱、基線亂、壓力不穩(wěn)
用含鹽后不沖鹽 → 鹽結(jié)晶毀泵、毀柱、毀閥（最傷儀器）
進(jìn)樣不過濾 / 樣品臟 → 柱頭污染、峰形差、柱壓飆升
流速 / 溫度突變 → 保留時(shí)間飄、柱壽命短
關(guān)機(jī)不沖柱直接關(guān) → 下次開機(jī)必出問題
簡單記：過濾脫氣、充分平衡、緩慢升降、含鹽必沖、干凈關(guān)機(jī)。做到這幾點(diǎn)，島津 HPLC 基本穩(wěn)定、少壞、數(shù)據(jù)準(zhǔn)。
島津2030plus高效液相色譜儀：實(shí)驗(yàn)室的精準(zhǔn)分析利器
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